Còig neart:
● Ionnsramaid air a rèiteachadh leis a 'cheum às-tharraing nucleic acid agus purified
● Ionnsramaid air a rèiteachadh le modal às-tharraing ultrasonic
● Ionnsramaid air a rèiteachadh le làn fèin-ghluasadach
● Ionnsramaid air a rèiteachadh le leudachadh teòthachd caochlaideach
● Ionnsramaid air a rèiteachadh le pasgan reagent làn dùinte
1.A bheil feum air ath-bheachdan lorg searbhag niuclasach a thoirt a-mach agus a ghlanadh?
Tha am prionnsapal lorg searbhag niuclasach mar a leanas: fo ghnìomhachd primer, bithear a’ cleachdadh DNA polymerase gus leudachadh ath-bhualadh slabhraidh a dhèanamh air teamplaid DNA/RNA (feumar ath-sgrìobhadh air ais de NA), agus an uairsin lorgar an ìre de chomharran flùraiseach a chaidh a leigeil ma sgaoil gus faighinn a-mach. co-dhiù a tha searbhag niuclasach (DNA/RNA) den phataig a tha ri lorg anns an t-sampall.
1) Faodaidh mòran phàirtean a bhith ann an sampaill nach deach a thoirt a-mach no a ghlanadh a bheir buaidh air an toradh deireannach: nuclease (a dh’ fhaodadh an searbhag niuclasach targaid a sgaoileadh agus àicheil meallta adhbhrachadh), protease (a dh’ fhaodadh DNA polymerase a lughdachadh agus àicheil meallta adhbhrachadh), meatailt throm salann (a tha a’ leantainn gu neo-ghnìomhachadh synthase agus ag adhbhrachadh dearbhach meallta), PH ro shearbhagach no ro alcaileach (a dh’ fhaodadh fàilligeadh air an ath-bhualadh), RNA neo-choileanta (a’ leantainn gu fàilligeadh tar-sgrìobhaidh ceàrr àicheil).
2) Tha e duilich cuid de shamhlaichean àrdachadh gu dìreach: Gram-positive agus cuid de dhìosganaich, air sgàth na ballachan cealla tiugh agus na structaran eile aca, mura tèid iad tron phròiseas às-tharraing agus glanadh searbhag niuclasach, dh’ fhaodadh an uidheamachd gun às-tharraing fàiligeadh airson a leithid. shampaill.
Mar sin, thathas a’ moladh an uidheamachd deuchainn no an ionnstramaid a thaghadh a rèir ceum às-tharraing searbhag niuclasach.
2. Às-tharraing ceimigeach no toirt a-mach briseadh corporra ultrasonic?
San fharsaingeachd, faodar às-tharraing ceimigeach a chuir an sàs anns a’ mhòr-chuid den ro-làimhseachadh agus purrachadh.Ach, ann am bacteria Gram-positive le ballachan tiugh agus cuid de dhìosganaich, tha e fìor cuideachd nach urrainn às-tharraing ceimigeach teamplaidean searbhag niuclasach èifeachdach fhaighinn, a’ leantainn gu lorg àicheil meallta.A bharrachd air an sin, bidh às-tharraing ceimigeach gu tric a’ cleachdadh riochdairean làidir, mura h-eil an elution coileanta, tha e furasta alkali làidir a thoirt a-steach don t-siostam ath-bhualadh, a’ leantainn gu toraidhean mearachdach.
Bidh briseadh ultrasonach a’ cleachdadh pronnadh corporra, a chaidh a chleachdadh gu soirbheachail le GeneXpert, prìomh iomairt ann an raon POCT airson cleachdadh daonna, agus tha làn bhuannachd aige ann a bhith a’ toirt a-mach searbhag niuclasach cuid de shamhlaichean iom-fhillte (leithid Mycobacterium tuberculosis).
Mar sin, thathas a’ moladh pasgan deuchainn no ionnstramaid a thaghadh a tha air a dhealbhadh le ceum às-tharraing searbhag niuclasach.agus tha e nas fheàrr ma tha modal tarraing ultrasonic ann.
3. Stiùireadh, Semi-fèin-ghluasadach agus gu tur fèin-ghluasadach?
Is e duilgheadas a tha seo a thaobh cosgais saothair agus èifeachdas obrach.Aig an àm seo, tha ospadalan peata gun luchd-obrach gu leòr, agus às-tharraing agus lorg searbhag niuclasach na obair a dh’ fheumas sgilean agus eòlas sònraichte.Chan eil teagamh sam bith gur e an inneal tarraing agus lorg searbhag niuclasach gu tur fèin-ghluasadach an roghainn cheart.
4. Meudachadh teòthachd seasmhach no àrdachadh teòthachd caochlaideach?
Is e ceangal lorg searbhag niuclasach a th’ anns an ath-bhualadh leudachaidh, agus tha an teicneòlas proifeasanta a tha an sàs sa cheangal seo iom-fhillte.Gu ìre mhòr, thathas a’ cleachdadh enzymes gus an searbhag niuclasach a mheudachadh.Anns a’ phròiseas leudachaidh, lorgar an comharra fluorescence meudaichte no an comharra flùraisean freumhaichte.San fharsaingeachd, mar as tràithe a nochdas an comharra fluorescence, is ann as motha a bhios susbaint gine targaid an t-sampall.
Is e àrdachadh teòthachd seasmhach àrdachadh searbhag niuclasach aig teòthachd stèidhichte, fhad ‘s a tha àrdachadh teòthachd caochlaideach na leudachadh cearcallach gu teann a rèir leudachadh dì-nàdurrach-annealing-extension.Chaidh an ùine leudachaidh teothachd seasmhach a dhèanamh, fhad ‘s a tha ìre àrdachadh teòthachd is tuiteam an ionnstramaid a’ toirt buaidh mhòr air an ùine leudachaidh teòthachd caochlaideach (an-dràsta, tha mòran de luchd-saothrachaidh air a bhith comasach air 40 cearcall leudachaidh a dhèanamh ann an timcheall air 30 mionaid).
Ma tha suidheachadh an obair-lann math agus gu bheil an sònrachadh teann, tha e reusanta a ràdh nach bi an eadar-dhealachadh mionaideachd eadar an dà rud mòr.Ach, bidh àrdachadh teòthachd caochlaideach a’ co-chur barrachd thoraidhean searbhag niuclasach ann an ùine gu math nas giorra.Airson deuchainn-lannan às aonais sònaichean teann agus luchd-obrach trèanaidh proifeasanta, bidh an cunnart bho aodion aerosol searbhag niuclasach nas motha, bidh an dearbhadh meallta a’ tachairt aon uair ‘s gun tachair aodion, agus a tha gu math duilich a chuir às.
A bharrachd air an sin, tha leudachadh teòthachd seasmhach cuideachd nas buailtiche leudachadh neo-shònraichte nuair a tha an sampall iom-fhillte (tha an teòthachd freagairt coimeasach nas ìsle, agus mar as àirde an teòthachd leudachaidh, is ann as fheàrr a bhios an sònrachadh ceangail primer).
A thaobh teicneòlas gnàthach, tha àrdachadh teòthachd caochlaideach nas earbsaiche.
5. Ciamar a sheachnadh an cunnart bho aoidionach stuthan leudachaidh aig nucleic acid?
Aig an àm seo, tha mòran de luchd-saothrachaidh a’ taghadh an tiùb PCR seòrsa gland mar an tiùb freagairt searbhag niuclasach, a tha air a seuladh le suathadh, agus tha an dì-ghalarachadh teòthachd anns an dì-nàdarachadh teòthachd caochlaideach anns an àrdachadh teòthachd caochlaideach PCR a’ ruighinn 90 ceum.
Ceud-ìre.Tha am pròiseas leudachaidh a-rithist le teas agus giorrachadh le fuachd na dhùbhlan mòr do sheulachadh an tiùb PCR, agus tha an tiùb PCR seòrsa gland gu ìre mhath furasta aoidionachd adhbhrachadh.
Tha e nas fheàrr gabhail ris an ath-bhualadh le pasgan / tiùb gu tur seulaichte gus nach tèid toradh an ath-bhualadh a sheachnadh.Bhiodh e foirfe nam biodh e comasach inneal làn seulaichte obrachadh a-mach airson às-tharraing agus lorg searbhag niuclasach.
Mar sin tha na còig roghainnean as fheàrr gu h-àrd aig inneal às-tharraing agus lorg searbhag niuclasach ùr New Tech.
Ùine puist: Lùnastal-09-2023
